使用 VisiSens TD 和 ViviPlate 进行 96 孔板的耗氧量监测 新开发的气密板夹详细介绍

通过呼吸测量测试植物种子活力

使用 VisiSens TD 和 ViviPlate 进行 96 孔板的耗氧量监测 新开发的气密板夹系统

G. Liebsch & R. Meier
PreSens Precision Sensing GmbH， 雷根斯堡， 德国

PreSens开发了传感器和夹具工具ViviPlate，可以创建微量滴定板格式的不同数量和体积的封闭呼吸器室。然后可以使用我们的成像系统VisiSens从上方平行读取这些腔室。所有腔室都通过覆盖可重复使用的传感器配备透明传感器板一步关闭。密封板和盖板在孔/小瓶和传感器位置带有孔，允许从上方光学访问荧光光学氧传感器。夹层用滚花螺钉挤压，将台板压在盖板上，确保每个孔/小瓶的气密密封。

ViviPlate允许通过监测微生物，组织或细胞的耗氧能量代谢来对多个样品进行Vi能力和Vitality测试。为此，ViviPlate评估氧气消耗率（OCR）。通过添加我们的一氧化碳2传感器 ViviPlate 将很快推出允许确定呼吸商 （O2吸收/一氧化碳2发布）。

在下面的应用程序中，我们展示了如何使用此工具在四种不同植物物种的 96 个样品中进行植物种子活力测试。在发芽期间，植物种子消耗氧气，种子呼吸可用作生存能力的指标。在我们的实验中，我们使用了新的传感器和夹具系统ViviPlate，该系统可以测量96孔板顶部空间中的氧气。将四种不同物种的植物种子放入96孔板中，每孔一个。光学氧传感器放置在每个孔的顶部，夹紧系统确保板和每个孔被密封。使用VisiSens TD系统读取氧传感器，该系统允许在一张图像中记录每个孔中的所有96个氧传感器，并随着时间的推移记录发芽期间呼吸引起的氧气减少。然后，VisiSens ScientifiCal软件允许在一个屏幕上显示所有样品的耗氧量。

     材料与方法

标准 96 孔板的每个孔填充 100 μL 1% Phytagel? （Sigma-Aldrich?）。在四个部分，每个部分24个孔中，每个孔中放置四种不同植物物种的一个种子（生菜，豆瓣菜，玉米沙拉和白甘蓝，Sperli GmbH;图3）。微量滴定板的所有孔都使用带有96个孔的密封和带有连接和预定位氧传感器点（SF-RPSu4，PreSens）的透明板来关闭。带有密封和传感器盖的 96 孔板放置在专门设计的夹具（ViviPlate、PreSens）中，该夹具可以用滚花螺钉固定，并确保孔的气密密封。上部夹板在孔上方的位置有孔，因此可以从上方读取氧传感器。荧光光学O2使用VisiSens TD成像系统（PreSens）在3天内以30分钟的间隔读取传感器。氧气记录使用VisiSens ScientifiCal软件（PreSens）进行可视化和分析。